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SPE凈化模式介紹

更新時間:2019-07-08 點擊次數(shù):5835

固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱SPE),也稱固相提取,是一項結合了選擇性保留、選擇性洗脫等過程的分離技術。 SPE也是一個柱色譜分離過程,分離機理、固定相和溶劑的選擇等方面與液相色譜(HPLC)有許多相似之處。

SPE是一種吸附劑萃取,樣品通過填充吸附劑的一次性萃取柱,分析物和雜質被保留在柱上,然后分別用選擇性溶劑去除雜質,洗脫出分析物,從而達到分離的目的。

SPE的凈化模式主要取決于填充劑的類型和溶劑的性質,有以下2種:

 

 

模式一:保留目標物,去除雜質

固相萃取操作一般有四步(見下圖1):

1)活化--除去小柱內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境(注意整個過程不要使小柱干涸)。

2)上樣--將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上(注意流速不要過快,以1ml/min 為宜,大不超過5ml/min)。

3)淋洗--da程度除去干擾物(建議此過程結束后把小柱*抽干)。

4)洗脫--用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集(注意流速不要過快,以1ml/min為宜)。

 

圖1.保留目標物凈化模式

 

絕大多數(shù)的樣品都是用保留目標物的模式凈化的,下面舉個例子:

 

食品中乙二胺四乙酸二鈉的檢測,樣品經(jīng)提取,絡合后,凈化;

SPE柱:月旭 Welchrom®SAX 150mg/6mL;

活化:5 mL 甲醇、5 mL 水,棄去;

上樣:待凈化液全部上樣,控制流速,不宜過快,棄去;

淋洗:依次用5mL水,5mL甲醇淋洗,抽干;

洗脫:5mL5%甲酸甲醇水洗脫,抽干,收集洗脫液定容至5mL,過0.22μm濾膜,供液相色譜儀測定。

 

圖2、八寶粥樣加標150mg/kg過柱圖譜

 

模式二:保留雜質

固相萃取操作一般有三步(見圖2):

 

1)、活化--除去柱子內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境(注意整個過程不要使小柱干涸)。

2)、上樣--將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上,故此步驟要開始收集(注意流速不要過快)。

3)、洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液(注意流速不要過快).

 

圖3.保留雜質凈化模式

 

這種凈化模式多用于食品或農(nóng)殘的檢測,下面舉個例子:

 

食品中丙烯酰胺的檢測,樣品經(jīng)提后,凈化;

SPE柱:月旭Welchrom® C18E 500 mg/6mL;

活化:5mL甲醇,5mL水;

上樣:待凈化液,收集;

洗脫:2mL30%甲醇分次潤洗燒瓶,再上樣,收集,抽干;

合并上樣液和洗脫液,并用30%甲醇水定容至5mL,并過0.22 µm濾膜,上HPLC檢測。

圖4.咖啡樣品加標10mg/kg

 

 

 

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