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“相塌陷”來(lái)的是如此突然

更新時(shí)間:2021-12-27 點(diǎn)擊次數(shù):1546

微信截圖_20211227133945.png

在疏水作用色譜也就是反相色譜中經(jīng)常能聽(tīng)到的名詞,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的表現(xiàn)形式為,對(duì)物質(zhì)沒(méi)有保留,出峰時(shí)間靠前,使得峰之間沒(méi)有保留。


案例

色譜柱:Ultimate® XB-C8 21.2×250mm,10μm。

流動(dòng)相:近似純水。

第一天 

正常活化進(jìn)樣色譜圖:


微信截圖_20211227134017.png

晚上不進(jìn)樣,由于流動(dòng)相中沒(méi)有酸堿等添加劑,清洗自動(dòng)進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)。


第二天 

直接流動(dòng)相沖洗2倍柱體積進(jìn)樣色譜圖:

(中間已經(jīng)進(jìn)樣過(guò)30多針)


微信截圖_20211227134204.png

一切正常,由于實(shí)現(xiàn)了色譜柱自由,樣品也足夠干凈,為了下周一過(guò)來(lái)能更快做實(shí)驗(yàn),仍然清洗自動(dòng)進(jìn)樣器后關(guān)機(jī)


周一 

平衡2倍柱體積進(jìn)樣:


微信截圖_20211227134235.png

出峰異常沒(méi)有峰,懷疑色譜柱沒(méi)有平衡好,畢竟過(guò)了周末,沖多洗一段時(shí)間,出峰正常,但是出峰提前了2分鐘幾個(gè)雜質(zhì)峰均為分離。

微信截圖_20211227134305.png

排查原因:

1、流動(dòng)相是否弄錯(cuò)了;

2、儀器參數(shù)設(shè)置是否正常;

3、儀器實(shí)際流速是否正常。

均正常后,懷疑色譜柱相塌陷,雖然C8的極性較強(qiáng),耐受高比例的水甚至純水,但是畢竟在近純水的環(huán)境中浸泡了48小時(shí),80%乙腈水沖洗5倍柱體積,再進(jìn)樣正常。

微信截圖_20211227134332.png

知識(shí)點(diǎn):反相色譜固定相。

例如:C18,C8,PHEYNL等耐受高比例的水甚至是純水,其實(shí)是指在這樣的流動(dòng)相體系中不發(fā)生相塌陷,保留時(shí)間峰面積等都穩(wěn)定,不影響日常檢測(cè)。


在這個(gè)案例中,C8鍵合相在長(zhǎng)時(shí)間浸泡在近純水的體系中仍然出現(xiàn)了相塌陷,因此,在較長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí)還是需要用較高比例的有機(jī)溶劑水進(jìn)行沖洗保持。



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